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常用的幾種抗原修復(fù)方法

更新時(shí)間:2012-09-10點(diǎn)擊次數(shù):658

1、微波爐加熱

   在微波爐里加熱0.01枸櫞酸鈉緩沖液(pH6.0)至沸騰后將組織芯片放入,斷電,間隔5-10分鐘,反復(fù)1-2次。

2、高壓熱修復(fù)

   在沸水中加入EDTA(pH8.0)或0.01m枸櫞酸鈉緩沖溶液(pH6.0).蓋上不銹鋼鍋蓋,但不能鎖定。將玻片置于金屬染色架上,緩慢加壓,使玻片在緩沖液中浸泡五分鐘,然后將蓋子鎖定,小閥門將會(huì)升起來(lái)。10分鐘后除去熱源,置入涼水中,當(dāng)小閥門沉下去后打開(kāi)蓋子。此方法適用于較難檢測(cè)或核抗原的抗原修復(fù)。(骨及軟骨組織的標(biāo)本選擇較溫和的微波加熱修復(fù))

3、沸熱修復(fù)

   電爐或水浴鍋加熱0.01M枸櫞酸鈉緩沖液(pH6.0)至95℃左右,放入組織芯片加熱10-15分鐘。

4、酶消化方法

   常用0.1%胰蛋白酶和0.4%胃蛋白酶液。胰蛋白酶使用前預(yù)熱37℃,消化時(shí)間約為5-30分鐘。適用于被固定遮蔽的抗原:包括Collagen.GFAP.Complement.Cytokeratin.c-erB-2.LCA.LN.等



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