2012-1015
一、凍存運(yùn)輸使用干冰置于塑料泡沫盒中，處理得當(dāng)，可以保存3天。一旦出現(xiàn)融解，細(xì)胞活力將急劇下降。將細(xì)胞凍存管嚴(yán)密包裹，所用塑料泡沫盒應(yīng)該不小于300×300×300mm，壁的厚度約為50mm，內(nèi)部空間為200×200×200mm，這樣大的空間需放入5kg干冰。以zui快的速度將細(xì)胞從液氮轉(zhuǎn)入干冰中，否則細(xì)胞將以10～20℃／min的速度升溫。不能讓溫度高于－50℃。到達(dá)目的地后，即可按常規(guī)復(fù)蘇處理。二、活細(xì)胞運(yùn)輸細(xì)胞應(yīng)該處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期早期或中期，狀態(tài)良好。如果細(xì)胞密度過大，培...
查看更多2012-1013
一、按劑型分類1、液體試劑①R1和R2分開保存,延長(zhǎng)穩(wěn)定性；瓶間差小，沒有復(fù)溶時(shí)水質(zhì)引起的差異，使用方便；②可較*排除樣品空白和內(nèi)外源干擾物。2、干粉試劑將各組份溶于液體中分裝再凍干，或用球磨粉碎、或混合后打成片劑，用前再加入量的緩沖液使其溶解（稱復(fù)溶）。二、按試劑組成分類1、單試劑①優(yōu)點(diǎn)：操作簡(jiǎn)便適用于各類生化分析，節(jié)約試劑位。②缺點(diǎn)：配方復(fù)雜（穩(wěn)定劑），穩(wěn)定性，不能*避免內(nèi)外源物質(zhì)干擾。2、雙試劑①優(yōu)點(diǎn)：可較*排除樣品空白和內(nèi)外源干擾物，試劑穩(wěn)定，便于儲(chǔ)存，運(yùn)輸和使用，可...
查看更多2012-1012
一、背景細(xì)胞存儲(chǔ)于-170°以下的液氮罐中，在細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)需要快速地將細(xì)胞凍存管放入37°水浴鍋中快速升溫至37°避免對(duì)細(xì)胞造成損傷。在復(fù)蘇過程中凍存管需要用手拿著在搖晃，一個(gè)人同時(shí)只能拿2-4管，當(dāng)復(fù)蘇較多的細(xì)胞時(shí)一個(gè)人就無法操作，這給復(fù)蘇細(xì)胞帶來了極大的不便。二、方法改進(jìn)采用一個(gè)裝15ml離心管的泡沫板制作一個(gè)凍存管托盤，其托盤為：將其底部穿通，孔夠凍存管的大小相當(dāng)，使凍存管放入恰好卡住；在托盤中間插一個(gè)桿作為手柄。在復(fù)蘇時(shí)將凍存管放在泡沫板托盤上，手拿著托盤手柄，將載有凍...
查看更多2012-1010
一、凍存細(xì)胞解凍步驟1、將細(xì)胞凍存管從加有液氮的保溫桶中用鑷子夾牢，快速在37度水浴鍋中擺動(dòng)，使凍存液迅速解凍融化。注意在這過程中盡量使凍存管蓋位于水面上。2、待凍存管中大部分內(nèi)容物已呈液態(tài)時(shí)，將凍存管表面消毒后移入生物安全柜。二、注意事項(xiàng)1、在細(xì)胞復(fù)蘇操作時(shí)，應(yīng)注意融化凍存細(xì)胞速度要快，可不時(shí)搖動(dòng)凍存管，使之盡快通過zui易受損的溫度段（-5～0℃）。這樣復(fù)蘇的凍存細(xì)胞存活率高，生長(zhǎng)及形態(tài)良好。2、從液氮罐中取出凍存管，有時(shí)因凍存管未封嚴(yán)，浸入了液氮，取出后因凍存管內(nèi)液氮迅...
查看更多2012-109
酶的校正要滿足在同一方法學(xué)、同一測(cè)定條件、與理論計(jì)算的FACTOR值差異不大，沒有發(fā)現(xiàn)有明顯影響因素，方可進(jìn)行校正。檢驗(yàn)結(jié)果溯源性，得建立一個(gè)可靠的參考系統(tǒng)作為準(zhǔn)確性基礎(chǔ)，然后將準(zhǔn)確性轉(zhuǎn)移到常規(guī)方法測(cè)定中去，使常規(guī)方法測(cè)定結(jié)果可溯源到參考系統(tǒng)所提供的準(zhǔn)確性基礎(chǔ)上來。在實(shí)現(xiàn)溯源性目標(biāo)過程中，永遠(yuǎn)以患者新鮮標(biāo)本為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，以方法學(xué)對(duì)比試驗(yàn)方法為驗(yàn)證手段。方法學(xué)對(duì)比試驗(yàn)常采用回歸方程進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，假如斜率接近1，截距較小，這意味著實(shí)驗(yàn)室常規(guī)方法對(duì)標(biāo)本測(cè)定結(jié)果和溯源目標(biāo)參考系統(tǒng)對(duì)標(biāo)本...
查看更多2012-929
一、原理細(xì)胞周期指細(xì)胞一個(gè)世代所經(jīng)歷的時(shí)間.從一次細(xì)胞分裂結(jié)束到下一次分裂結(jié)束為一個(gè)周期.細(xì)胞周期反應(yīng)了細(xì)胞增殖速度.單個(gè)細(xì)胞的周期測(cè)定可采用縮時(shí)攝影的方法,但它不能代表細(xì)胞群體的周期,故現(xiàn)多采用其他方法測(cè)群體周期.測(cè)定細(xì)胞周期的方法很多,有同位素標(biāo)記法,細(xì)胞計(jì)數(shù)法等,這里介紹一種利用BrdU滲入測(cè)定細(xì)胞周期的方法.BrdU（5-溴脫氧尿嘧啶核苷）加入培養(yǎng)基后,可做為細(xì)胞DNA復(fù)制的原料,經(jīng)過兩個(gè)細(xì)胞周期后,細(xì)胞中兩條單鏈均含BrdU的DNA將占l/2,反映在染色體上應(yīng)表現(xiàn)為...
查看更多2012-927
抗體按理化性質(zhì)和生物學(xué)功能，可將其分為IgM、IgG、IgA、IgE、IgD五類。1、IgM抗體是免疫應(yīng)答中首先分泌的抗體。它們?cè)谂c抗原結(jié)合后啟動(dòng)補(bǔ)體的級(jí)聯(lián)反應(yīng)。它們還把入侵者相互連接起來，聚成一堆便于巨噬細(xì)胞的吞噬;2、IgG抗體激活補(bǔ)體，中和多種毒素。IgG持續(xù)的時(shí)間長(zhǎng)，是*能在母親妊娠期穿過胎盤保護(hù)胎兒的抗體。他們還從乳腺分泌進(jìn)入初乳，使新生兒得到保護(hù);3、IgA抗體進(jìn)入身體的黏膜表面，包括呼吸、消化、生殖等管道的黏膜，中和感染因子。還可以通過母乳的初乳把這種抗體輸送到...
查看更多2012-926
一、凍存和復(fù)蘇的原則：慢凍快融當(dāng)細(xì)胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細(xì)胞器脫水，細(xì)胞中可溶性物質(zhì)濃度升高，并在細(xì)胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細(xì)胞逐步脫水，細(xì)胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反結(jié)晶就大，大結(jié)晶會(huì)造成細(xì)胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復(fù)蘇過程應(yīng)快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結(jié)晶。二、標(biāo)準(zhǔn)程序當(dāng)溫度在-25℃以上時(shí)，1～2℃/min當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí)，5～10℃/min，當(dāng)溫度達(dá)-100℃時(shí)，可迅速放入液氮中三、簡(jiǎn)易程序?qū)龃婀埽ü芸谝希┓湃爰啿即鼉?nèi)，紗...
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