2012-924
一、標(biāo)本的采取和保存大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集，應(yīng)注意避免溶血，紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì)，HRP為標(biāo)記的ELISA測(cè)定中，以溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)。如有細(xì)菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP，也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng)。一般說(shuō)來(lái)，在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃，標(biāo)本在冰箱中保存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致血清IgG聚合，使間接法的試劑本底加深。超過(guò)一周測(cè)定的需－20℃保存。凍結(jié)血清融解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均...
查看更多2012-921
單克隆抗體問(wèn)世以來(lái)，由于其*的特征已迅速應(yīng)用于醫(yī)學(xué)很多領(lǐng)域。主要表現(xiàn)在以下幾個(gè)方面。1．檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)診斷試劑作為檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的診斷試劑，單克隆抗體以其特異性強(qiáng)、純度高、均一性好等優(yōu)點(diǎn)，廣泛應(yīng)用于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、放射免疫分析、免疫組化和流式細(xì)胞儀等技術(shù)。并且單克隆抗體的應(yīng)用，很大程度上促進(jìn)了商品化試劑盒的發(fā)展。目前，應(yīng)用單克隆抗體制作的商品化試劑盒廣泛應(yīng)用于：①病原微生物抗原、抗體的檢測(cè)；②腫瘤抗原的檢測(cè)；③免疫細(xì)胞及其亞群的的檢測(cè)；④激素測(cè)定；⑤細(xì)胞因子的測(cè)定。單克隆抗體對(duì)抗...
查看更多2012-921
1、試管、燒杯、漏斗等玻璃儀器如無(wú)特殊要求，用洗衣粉刷洗內(nèi)壁，自來(lái)水沖凈后，純凈水潤(rùn)洗三次，以內(nèi)壁不掛水珠為準(zhǔn)，自然晾干。有效期為七日，過(guò)期后使用時(shí)重新洗滌。2、液相色譜、氣相色譜使用的進(jìn)樣瓶洗滌方法和原則與滴定管相同。3、效價(jià)用雙碟用完后，先浸入來(lái)蘇水中24h，取出超聲20分鐘，自來(lái)水逐個(gè)沖凈，純凈水潤(rùn)洗后，以碟上不掛水珠為準(zhǔn)自然晾干，裝入桶內(nèi)。160℃干烤2小時(shí)滅菌備用。有效期為七日，過(guò)期后使用時(shí)重新160℃干烤2小時(shí)即可。4、微生物限度測(cè)定用三角瓶、刻度吸管、試管、雙碟...
查看更多2012-912
抗體的L鏈?zhǔn)怯蒀、V、J三個(gè)基因簇編碼的，H鏈由C、V、D、J四個(gè)基因簇編碼的。是編碼可變區(qū)，300個(gè)種類(lèi)；編碼高變區(qū),有15～20個(gè)種類(lèi)；編碼連接V、V有DJC的結(jié)合區(qū)，4～5個(gè)種類(lèi)；編碼恒定區(qū)，有C僅有一種。這些外顯子通過(guò)多種多樣的重排，所合成出的肽鏈，還要再進(jìn)一步進(jìn)行L和H鏈組合，這樣zui后生成的抗體種類(lèi)就非常多了?？贵w基因重排是發(fā)生在淋巴細(xì)胞分化的時(shí)候。按理化性質(zhì)和生物學(xué)功能，可將其分為IgM、IgG、IgA、IgE、IgD五類(lèi)。1、IgM抗體是免疫應(yīng)答中首先分泌的...
查看更多2012-910
1、微波爐加熱在微波爐里加熱0.01枸櫞酸鈉緩沖液（pH6.0）至沸騰后將組織芯片放入，斷電，間隔5-10分鐘，反復(fù)1-2次。2、高壓熱修復(fù)在沸水中加入EDTA（pH8.0）或0.01m枸櫞酸鈉緩沖溶液（pH6.0）.蓋上不銹鋼鍋蓋，但不能鎖定。將玻片置于金屬染色架上，緩慢加壓，使玻片在緩沖液中浸泡五分鐘，然后將蓋子鎖定，小閥門(mén)將會(huì)升起來(lái)。10分鐘后除去熱源，置入涼水中，當(dāng)小閥門(mén)沉下去后打開(kāi)蓋子。此方法適用于較難檢測(cè)或核抗原的抗原修復(fù)。（骨及軟骨組織的標(biāo)本選擇較溫和的微波加熱...
查看更多2012-97
一、化凍將血清（FetalBovineSerum，Hyclone）從－20℃冰箱取出，放于4℃冰箱化凍過(guò)夜；也可室溫（或浸于自來(lái)水中）化凍，化凍后若不馬上滅活，可以放入4℃冰箱暫時(shí)保存；二、滅活1、放入室溫的水浴鍋內(nèi)開(kāi)始加熱（同時(shí)放入一個(gè)內(nèi)裝200ml自來(lái)水的血清瓶，插入一根溫度計(jì)，溫度監(jiān)控以此為準(zhǔn)）；2、當(dāng)溫度計(jì)顯示56℃時(shí)，控制在此溫度30分鐘±3分鐘；若不小心使溫度上升超過(guò)56℃，則：若仍未超過(guò)60℃，且時(shí)間很短（比如：不超過(guò)5分鐘），則仍可使用；若超過(guò)6...
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1、常規(guī)方法將細(xì)胞消化成單細(xì)胞懸液；2、轉(zhuǎn)入試管，1000轉(zhuǎn)/分鐘離心5分鐘；3、配適量?jī)龃嬉海楹?0%二甲亞砜（DMSO），10%FBS的DMEM培養(yǎng)液）；4、棄上清，每管加入1ml凍存液，吹打成細(xì)胞懸液（只要使ES細(xì)胞分散成3—5個(gè)細(xì)胞的小團(tuán)塊即可），轉(zhuǎn)入凍存管，作好標(biāo)簽；5.放入程序凍存盒內(nèi)24小時(shí)后轉(zhuǎn)入液氮罐中凍存。相關(guān)產(chǎn)品信息：凍存管,凍存盒,管鼓蓋,加樣槽,PCR板,PCR管架,Sigma現(xiàn)貨,Abcam抗體,GE試劑,Amresco試劑
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1、準(zhǔn)備凍存管、凍存盒放置需液氮中保存的樣品。2、液氮中有三個(gè)取液氮容器，不宜直接將凍存管放于液氮罐中，這樣會(huì)使凍存管漂浮起來(lái)。固可用紗布、棉線將取氮容器口封住，保存樣品。3、取樣品時(shí)，需要使用研缽。研缽在使用前，需清洗，并用純酒精灼燒以充分滅菌。在研磨液氮保存的樣品時(shí)，需加入液氮，迅速研磨，待組織變軟，再加少量液氮，再研磨。如此三次?？捎孟具^(guò)的鑰匙將研缽中的組織樣品轉(zhuǎn)入EP管中。介于所取的樣品不能*轉(zhuǎn)移到EP管中，故而在取樣時(shí)需多取樣品，以免不夠。4、新買(mǎi)的液氮罐需用一定...
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